果膠酯酶

 

果膠酯酶（pectinesterase）為pectin pectylhydrase之常用名，亦稱為果膠酶、果膠甲酯酶、果膠氧化酶。為催化果膠的甲氧酯水解產生果膠酸和甲醇反應的酶。EC3·1·1·11。除廣泛分布于高等植物外，已知在霉菌、細菌中也存在。對脫酯反應的底物特異性尚不十分清楚。因此酶在高等植物中幾乎僅作用于甲酯，所以有對此酶應使用果膠甲酯酶這一名稱的意見。活性測定是以果膠為底物，對在一定條件下產生的羧基用堿定量；另也有通過對所產生的甲醇進行定量的方法。最適pH為8—4，視酶源而異。一些陽離子特別是Na+、Ca2+等可提高此酶的活性。

 

一種DNA構建體，此構建體包含編碼顯示果膠酯酶活性的酶的DNA序列，其中所說的DNA序列包含：a）克隆進存在于大腸桿菌DSMI0357中的質粒pYES2．1中的DNA序列的果膠酯酶編碼部分，或b）a）中限定的DNA序列的類似序列，該序列i）與a）中限定的DNA序列至少60%是同源的，或ii）與SEQIDNO：l中位置4-933中顯示的DNA序列在低嚴格性下雜交，或iii）編碼一種多肽，該多肽與白包含a）中限定的DNA序列的DNA序列編碼的多肽至少50%是同源的，或iV）編碼一種多肽，該多肽與針對由a）中限定的DNA序列編碼的純化的果膠酯酶產生的抗體是免疫反應性的。

采用明膠加戊二醛包埋法和蛋殼微粒吸附法分別對黑曲霉果膠酯酶進行了固定化，并研究了兩種固定化方法制備得到的固定化黑曲霉果膠酯酶的酶學性質。結果表明，通過固定化，黑曲霉果膠酯酶的各項酶學性質指標都得到了改善，明膠固定化果膠酯酶和蛋殼固定化果膠酯酶的酶活回收率分別為46．3%和42.2%，而且與游離果膠酯酶相比，兩種固定化酶的最適溫度都由40℃上升到45℃，最適pH由4．4下降到4．0和4．2，Km值0．0113%由下降到0．0033%和0．0027%。 

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