迷迭香提取物

迷迭香(Rosmarinus oficinalis L.)也叫油安草，系唇形科鼠尾草屬植物,常綠小灌木，原產(chǎn)歐洲、北非及地中海沿岸,近年來(lái)在我國(guó)云南、廣西、海南、湖南、四川、貴州、福建等省區(qū)均有種植。迷迭香是一種多用途的經(jīng)濟(jì)作物,從中可提取抗氧化劑、迷迭香精油等。抗氧化劑的主要成分是具有抗氧化功能的二萜類(lèi)、黃酮類(lèi)、三萜類(lèi)等化合物;迷迭香精油則是一種由30多種揮發(fā)性成分組成的液態(tài)油狀物。

迷迭香提取物具有高效、安全等特性,廣泛應(yīng)用于化妝品、香水、香皂、空氣清新劑驅(qū)蟲(chóng)劑、醫(yī)藥各種動(dòng)植物油脂、動(dòng)物飼料、肉制品、海產(chǎn)品、面粉、調(diào)味醬、調(diào)味料、烘焙食品、油炸產(chǎn)品、天然色素、香精、生物農(nóng)藥、煙草等領(lǐng)域，特別是可以治療血液惡性腫瘤、心血管病、抗癌、抑制艾滋病毒的感染、治療消化不良、預(yù)防老年癡呆癥、心臟病、高尿酸血癥以及呼吸系統(tǒng)的疾病等,為生產(chǎn)、生活帶來(lái)了許多方便。在歐洲,迷迭香作為食品香料有悠久的歷史,現(xiàn)已應(yīng)用于化妝品、食品以及藥品等方面。現(xiàn)有研究表明,迷迭香在防止油脂氧化、保持肉類(lèi)風(fēng)味等方面具有明顯效果,日本現(xiàn)已開(kāi)發(fā)出系列迷迭香抗氧化劑產(chǎn)品;。

迷迭香提取物主要包括鼠尾草酚、迷迭香二醛、表迷迭香酚、表迷迭香酚甲醚、鼠尾草酸、鼠尾草酸甲酯、迷迭香酚、熊果酸、齊墩果酸等萜類(lèi)物質(zhì),芹菜素、橙皮素、高車(chē)前苷、芫花素等黃酮類(lèi)物質(zhì)，香草酸、咖啡酸、迷迭香酸、阿魏酸等酚酸類(lèi)物質(zhì)以及含有α-蒎烯、三環(huán)萜、對(duì)傘花烴、檸檬烯、1,8-桉葉油素、龍腦、樟腦、α-松油醇、β-松油醇、松油烯-4-醇等成分的迷迭香精油。

根據(jù)這些物質(zhì)在水中的溶解性，可以將其分為兩類(lèi):水溶性提取物和脂溶性提取物。 

水溶性提取物主要包括迷迭香酸、綠原酸、咖啡酸、阿魏酸、L-抗壞血酸、橙皮苷和異橙皮苷等,目前研究比較多的主要包括以下幾種:

迷迭香酸(rosmarinicacid),即(2R)-2-[[(2E)-3-(3,4-dihydroxyphenyl)-1-oxo-2-propenyl]-oxy]-3-(3,4-dihyroxyphenyl)propanoicacid；

相對(duì)分子式為C18H16O8，相對(duì)分子質(zhì)量為360.31；CAS號(hào)為537-15-5。

咖啡酸(caffeicacid),化學(xué)名稱(chēng)為3-(3,4-Dihydroxy-phenyl)-2-propenoicacid“；

分子式為C9H8O4,相對(duì)分子質(zhì)量為180.16；CAS號(hào)為331-39-5。

抗壞血酸(as-corbicacid),即(5R)-[(1S)-1,2diydroxyethyl]-3,4-dibydroxyfuran-2(5H)-one;

分子式為C6H8O6。,相對(duì)分子質(zhì)量為176.12,CAS號(hào)為50-81-7。

脂溶性提取物包括鼠尾草酸、鼠尾草酚、齊墩果酸、熊果酸、柚皮背、芝麻酚、迷迭香酚、迷迭香堿、異迷迭香堿、7-乙氧基迷迭香酚、7-甲氧基迷選香酚等，目前研究比較多的主要包括以下幾種:

鼠尾草酸(carnosicacid),即(4aR-trons)-1,3,4,9,10,10a-hexahydro-s,6-dihydraxy-1,1-dimethyl-7-(l-methyle-thyl)-4a(2H)phenanthrenecabuxylieacid,為二萜類(lèi)化合物；

分子式為C20H28O4,相對(duì)分子質(zhì)量為332.43,CAS號(hào)為3650-09-7。

鼠尾草酚(carmosol),同樣是二萜類(lèi)化合物；

分子式為C20H26O4,,相對(duì)分子質(zhì)量為330.42.,CAS號(hào)為5957-80-2。

熊果酸(ursolicacid)分子式為C30H48O3,相對(duì)分子質(zhì)量為456.70,CAS號(hào)為77-52-1。

齊墩果酸(oleanolicacid),是五環(huán)三萜類(lèi)化合物.分子式為C30H48O3，相對(duì)分子質(zhì)量為456.70,CAS號(hào)為508-02-1。

熊果酸與齊墩果酸互為三萜類(lèi)同分異構(gòu)體,性質(zhì)相似，往往同時(shí)存在,而鼠尾草酸可以轉(zhuǎn)化為鼠尾草酸甲酯、鼠尾草酚,鼠尾草酚可以轉(zhuǎn)化為表迷迭香酚.迷迭香酚以及7-甲氧基迷迭香酚。

抗氧化劑作用機(jī)理。現(xiàn)已公認(rèn)迷迭香是一種高效的天然抗氧化劑。抗氧化劑按其作用原理可分為:

(1)自由基終止劑,大多數(shù)為酚類(lèi)結(jié)構(gòu)的化合物,如叔丁基羥基苯甲醚(BHA)、二叔丁基羥基甲苯(BHT)、叔丁基氫醌(TBHQ)和生育酚等；

(2)還原劑,如抗壞血酸及其鹽類(lèi)、亞硫酸及其鹽類(lèi)、核黃素等;

(3)螯合劑,，如EDTA檸檬酸、植酸等;

(4)單線(xiàn)態(tài)氧抑制劑,如胡蘿卜素等。迷迭香抗氧化劑不但是一種自由基終止劑,而且是一種單線(xiàn)態(tài)氧抑制劑。

從迷迭香中提取的抗氧化成分除黃酮外,主要是鼠尾草酚、鼠尾草酸、迷迭香酸和迷迭香酚,它們都具有酚雙萜的活性部位。此外，迷迭香中還含有迷迭香二酚、迷迭香醌等多種不同的酚類(lèi),這些酚類(lèi)物質(zhì)之間以加合作用來(lái)表現(xiàn)整體的抗氧化性。迷迭香的這些抗氧化成分作為斷鏈型自由基終止劑,是通過(guò)捕獲過(guò)氧自由基來(lái)抑制過(guò)氧化鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的進(jìn)行,由于生成的酚氧自由基相對(duì)穩(wěn)定，它與類(lèi)脂化合物反應(yīng)很慢,從而阻斷了自由基鏈傳遞和增長(zhǎng),抑制氧化過(guò)程的進(jìn)展。

迷迭香酸是一種有一定生理活性的酚酸類(lèi)化合物,其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是兩個(gè)苯環(huán)上有四個(gè)-OH。因此,它是迷迭香中一種有效的抗氧化成分。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，迷迭香酸有溫和的抗血栓作用,其機(jī)理可能與抗血小板聚集和增加纖維蛋白溶解活性有關(guān)。

黃煉棟等報(bào)道,迷迭香酸的抗炎機(jī)理可能是:(1)與抑制花生四烯酸代謝中的5-脂氧化酶(5-LO)有關(guān)。(2)對(duì)補(bǔ)體依賴(lài)性PGI2的合成產(chǎn)生抑制作用，干擾不同途徑C3轉(zhuǎn)化酶的活性。(3)抗氧化及消除自由基。

目前,迷迭香的抗氧化功能主要應(yīng)用于食品抗氧化劑和防腐劑。迷迭香干葉作為食品香辛料有著悠久的歷史，現(xiàn)代研究表明,迷迭香的非揮發(fā)性成分具有明顯的抗氧化作用，其主要有效成分鼠尾草酚的抗氧化活性和BHA相當(dāng)，迷迭香酚的抗氧化活性是BHT和BHA的5倍。它是新一代純天然抗氧化劑，徹底避免了合成抗氧化劑的毒副作用和高溫分解的弱點(diǎn)。毒理實(shí)驗(yàn)和高溫油炸實(shí)驗(yàn)證明,該產(chǎn)品具有安全、高效、耐熱、廣譜等特點(diǎn)。迷迭香獨(dú)特的抗氧化功能已在國(guó)外進(jìn)行了廣泛研究與應(yīng)用,但中國(guó)在這方面研究剛剛起步，其應(yīng)用卻幾近空白。

美、日是研究迷迭香抗氧化劑最早國(guó)家。日本用迷迭香的95%乙酸提取物制成防止香精香料變質(zhì)的添加劑,并添加于類(lèi)胡蘿卜素等天然食用色素,防止其氧化褪色。中國(guó)科學(xué)院經(jīng)過(guò)十幾年的迷迭香研究,不但完成了引種栽培的實(shí)驗(yàn)，在抗氧化有效成分提取、分離和結(jié)構(gòu)鑒定，抗氧化效能實(shí)驗(yàn)，生產(chǎn)工藝流程和超臨界CO2萃取工藝的研究，以及迷迭香精油產(chǎn)量成分香氣特征的研究等方面,都取得可喜的成果。
鼠尾草酚作為抗氧化和抗微生物添加劑已廣泛用于食品和醫(yī)藥工業(yè)。HongC.T.等通過(guò)長(zhǎng)期和短期的動(dòng)物模型研究發(fā)現(xiàn)，迷迭香提取物和其成分對(duì)于誘發(fā)腫瘤的生物生長(zhǎng)有潛在抑制作用。迷迭香酸具有明顯的解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗氧化、抗血栓和溶解纖維蛋白的活性,本品還有望開(kāi)發(fā)成為抗血栓新藥。

冷卻豬肉氧化機(jī)理：脂類(lèi),特別是不飽和脂肪酸的氧化是引起肉類(lèi)變質(zhì)的主要原因。當(dāng)不飽和脂肪酸在空氣中被氧氣作用而發(fā)生一系列反應(yīng),氧化產(chǎn)物進(jìn)一步分解生成低級(jí)脂肪酸、醛和酮,這種氧化降解使得產(chǎn)品的質(zhì)量如顏色、香味、組織結(jié)構(gòu)甚至營(yíng)養(yǎng)成分等都發(fā)生了變化。脂肪酸的這種改變主要是通過(guò)游離基的氧化完成的,這種氧化分三個(gè)階段。

冷卻豬肉的抗氧化。在肉類(lèi)中,氧化與抗氧化存在一種平衡,主要影響因素有:氧化作用的底物(脂肪酸、氧);氧化強(qiáng)化劑(過(guò)度金屬元素、酶、含鐵蛋白質(zhì));抗氧化劑;因此,防止肉類(lèi)氧化變質(zhì)可以通過(guò)改變氧化作用底物、減少氧化強(qiáng)化作用和使用抗氧化劑來(lái)達(dá)到。而在冷卻豬肉的抗氧化過(guò)程中,前兩者由于要改變?nèi)忸?lèi)成分或環(huán)境,所以,往往冷卻豬肉的抗氧化往往通過(guò)使用抗氧化劑來(lái)實(shí)現(xiàn)。
食品抗氧化劑包括合成抗氧化劑和天然抗氧化劑。合成抗氧化劑有叔丁基對(duì)甲酚(BHT)、叔丁基羥基茴香醚(BHA)、叔丁基氫醌(TBHQ)、沒(méi)食子酸丙酯(PG)等。但在20世紀(jì)70年代，人們?cè)囼?yàn)發(fā)現(xiàn)過(guò)量的BHT、BHA會(huì)引起動(dòng)物肝臟增大,并有致癌的可能性,因此人們?cè)絹?lái)越關(guān)注天然抗氧化劑。常見(jiàn)的天然抗氧化劑有VC、VE、迷迭香、茶多酚等，其不但抗氧化能力強(qiáng),最引人關(guān)注的是其安全性，因此近年來(lái)天然抗氧化劑被普遍應(yīng)用于食品中。將迷迭香抗氧化成分應(yīng)用于冷卻豬肉指日可待。

從果蠅生存試驗(yàn)中看出,迷迭香提取物各劑量組均能延長(zhǎng)果蠅的壽命,并隨著迷迭香提取物濃度的增大,在一定濃度范圍呈劑量-效應(yīng)關(guān)系。5mg/mL劑量組果蠅的半數(shù)死亡時(shí)間，平均壽命和最高壽命均低于其它兩個(gè)劑量組,與對(duì)照組相比平均壽命無(wú)顯著性差異。這可能跟迷迭香提取物有較大氣味，影響果蠅攝入量有關(guān);也可能是較高劑量的迷迭香提取物會(huì)產(chǎn)生一定毒性作用有關(guān)。
國(guó)內(nèi)外研究表明,迷迭香提取物是一種高效天然抗氧化劑,其抗氧化組分主要有鼠尾草酚、鼠尾草酸、迷迭香酚、迷迭香酸。王虹等研究發(fā)現(xiàn)迷迭香酸能提高抗氧化酶的活性,清除自由基,減少過(guò)氧化脂質(zhì)的生成,起到延緩衰老的作用。結(jié)果顯示，喂飼迷迭香提取物30d后，1mg/mL和3mg/mL劑量組可顯著提高果蠅機(jī)體抗氧化酶活性,同時(shí)抑制脂質(zhì)過(guò)氧化物MDA的產(chǎn)生，有效延緩衰老。由此推測(cè)迷迭香提取物延緩衰老的機(jī)制可能是由于迷迭香提取物中的抗氧化組分能夠提高機(jī)體抗氧化酶活性,清除機(jī)體過(guò)量自由基，維持自由基代謝的平衡，從而減少了自由基引起的生物膜脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng),保護(hù)機(jī)體的正常新陳代謝。

迷迭香提取物的分析測(cè)定方法主要包括:高效液相色譜法膠束電動(dòng)色譜法、紫外光譜分析法、紅外光譜分析法、毛細(xì)管電泳法(CE)、氣相色譜法，質(zhì)譜法、核磁共振波譜法等，而目前使用最多的分析方法則是高效液相色譜法。

檢測(cè)器的選擇光電二極管陣列檢測(cè)器(DAD)是讓所有波長(zhǎng)的光都通過(guò)流動(dòng)池,然后通過(guò)一系列分光技術(shù),使所有波長(zhǎng)的光在接受器上被檢,以氘燈和鎢燈作光源，覆蓋190~800nm的光譜區(qū)域，可以有效限制基線(xiàn)噪音,又可以在更高波長(zhǎng)處提高靈敏度,是一種可以同時(shí)得到時(shí)間、光強(qiáng)度和波長(zhǎng)的新型的紫外檢測(cè)器。如在分析迷迭香酸和鼠尾草酸的時(shí)候,掃描后可以選擇的檢測(cè)波長(zhǎng)為210、230、330nm或285nm;唐麗琴等測(cè)定齊墩果酸與熊果酸的含量,所使用的檢測(cè)波長(zhǎng)220nm;有些研究在同時(shí)測(cè)定鼠尾草酸、鼠尾草酚、迷迭香酚、表迷迭香酚等成分的含最時(shí),檢測(cè)波長(zhǎng)選擇230nm;而在測(cè)定迷迭香酚、鼠尾草酚、百里酚、表迷迭香酚、柚皮苷、迷迭香酸、咖啡酸、鼠尾草酸的含量時(shí)，檢測(cè)的波長(zhǎng)選擇280nm;在檢測(cè)鼠尾草酚、鼠尾草酸、迷迭香酚、7-甲氧基迷迭香酚鼠尾草酸甲酯等成分時(shí),檢測(cè)波長(zhǎng)選擇284nm;Fereres等在分析迷迭香山奈酚及3-葡萄糖甘等成分的時(shí)候,選擇的檢測(cè)波長(zhǎng)為350nm。
蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)作為一種新型通用型檢測(cè)器，可以檢測(cè)沒(méi)有紫外吸收或僅在紫外末端有吸收的有機(jī)成分。隨著技術(shù)的不斷改進(jìn)和完善,蒸發(fā)光散射檢測(cè)器越來(lái)越多的應(yīng)用于醫(yī)藥化工、食品等領(lǐng)域。與其它的檢測(cè)器相比,它消除了溶劑的干擾和因溫度變化引起的基線(xiàn)漂移,特別適用于梯度洗脫。ELSD也可與MS通用色譜條件，相互補(bǔ)充，在物質(zhì)的高靈敏度、結(jié)構(gòu)分析中發(fā)揮著重要作用。如Bicchi等采用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器來(lái)檢測(cè)鼠尾草酸、鼠尾草酚、迷迭香二醛、迷迭香酚、表迷迭香酚以及相對(duì)分子質(zhì)量為332和346的未知成分(可能沒(méi)有紫外吸收)的含量，Backleh等采用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器來(lái)對(duì)鼠尾草酸、鼠尾草酚、鼠尾草酸甲酯等成分進(jìn)行定性分析。
高效液相色譜法主要是應(yīng)用于迷迭香提取物的定量(外標(biāo)法)分析,測(cè)評(píng)參數(shù)包括重現(xiàn)性、回收率、穩(wěn)定性以及精密度的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)誤差(RSD),以此來(lái)確定分析結(jié)果的重現(xiàn)性、可靠性穩(wěn)定性和精密度,以及評(píng)價(jià)外標(biāo)法標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的線(xiàn)性相關(guān)度(R2)是否在合理的區(qū)間內(nèi)。根據(jù)已有的研究報(bào)道,通常認(rèn)為當(dāng)所測(cè)定實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重現(xiàn)性的RSD小于1%，表明重現(xiàn)性良好，回收率的RSD小于2%時(shí)，較為可靠,當(dāng)所測(cè)定的峰面積的RSD小于3%時(shí)，表明穩(wěn)定性良好,測(cè)定精密度的RSD在小于3.5%時(shí),表明精密度良好。而外標(biāo)法的標(biāo)準(zhǔn)山線(xiàn)的范圍則是以實(shí)際要檢測(cè)的迷迭香提取物的含量范圍為標(biāo)準(zhǔn),然后通過(guò)考察線(xiàn)性相關(guān)度等來(lái)確定標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的準(zhǔn)確性。如Tena等6使用的外標(biāo)法的線(xiàn)性范圍是100~1000μg/mL,而鼠尾草酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的相對(duì)誤差小于0.1%,結(jié)果表明,實(shí)驗(yàn)可行，數(shù)據(jù)可常;Wang等采用外標(biāo)法進(jìn)行檢測(cè),標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的線(xiàn)性相關(guān)度(R2)為0.99995，表明該方法可以有效進(jìn)行測(cè)最,其所得數(shù)據(jù)是可靠的。

檢測(cè)迷迭香提取物的其它方法主要包括1HNMR、13CNMR、IR、MS、GC、CE以及幾種檢測(cè)方法聯(lián)用,不同的檢測(cè)方法均具有自身的分析特點(diǎn)。

氣相色譜是利用不同物質(zhì)在流動(dòng)相和固定相分配系數(shù)的差別，使不同化合物從色譜柱流出的時(shí)間不同，以達(dá)到分高的目的。

質(zhì)譜是利用帶電粒子在磁場(chǎng)或電場(chǎng)中的運(yùn)動(dòng)規(guī)律,按其質(zhì)荷比(m/z)實(shí)現(xiàn)分離分析,測(cè)定離子質(zhì)量及其強(qiáng)度分布。

核磁共振的方法可以具體分析含有氫原子的有機(jī)物的結(jié)構(gòu),深入物質(zhì)內(nèi)部面不破壞樣品，具有迅速推確分辨率高等優(yōu)點(diǎn)。

紫外可見(jiàn)分光光度法主要應(yīng)用于定量分析,也可以進(jìn)行純度檢驗(yàn),初步推測(cè)化合物的結(jié)構(gòu),與標(biāo)準(zhǔn)物及標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照來(lái)確定物質(zhì)的存在等。

方法聯(lián)用能夠使幾種儀器的優(yōu)缺點(diǎn)互補(bǔ),具有更大的分析優(yōu)勢(shì)。這些方法主要用于迷迭香提取物的定性與定量分析。

總結(jié)
迷迭香提取物中含有二萜類(lèi)、黃酮類(lèi)及三萜類(lèi)化合物,可以使用的分析檢測(cè)方法包括高效液相色譜法.膠束電動(dòng)色譜法、紫外光普分析法、紅外光譜分析法,毛細(xì)管電泳法、氣相色譜法、質(zhì)譜法、核磁共振波譜法等。在實(shí)際的分析過(guò)程中,常采用質(zhì)譜法、核磁共振波譜法等進(jìn)行定性檢測(cè),采用高效液相色譜法進(jìn)行定量檢測(cè)，