溶菌酶

中文名稱：溶菌酶

中文同義詞：脆壁質(zhì)酶；雞蛋白；胞壁質(zhì)酶(N-乙酰胞壁質(zhì)聚糖水解酶);溶菌酶(雞蛋清)

英文名稱：Lysozyme,簡(jiǎn)稱LZM

英文同義詞：REDUCED LYSOZYME,WATER SOLUBLE;MUCOPEPTIDE-GLYCOHYDROLASE;MUCOPEPTIDE GLYCOLHYDROLASE;MUCOPEPTIDE N-ACETYLMURAMOYLHYDROLASE;VI: CHLORIDE;MURAMIDASE;MURAMIDASE GRADE III

CAS號(hào)：12650-88-3

EINECS號(hào)： 235-747-3 

分子式：無(wú)

分子量：14000左右

EINECS號(hào)：235-747-3

相關(guān)類別：發(fā)酵劑；Enzymes;酶；生化試劑；生物化學(xué)品。

儲(chǔ)存條件：2-8°C

form：powder

color：white

危險(xiǎn)品標(biāo)志B

安全說明23-24/25-22

WGK Germany3

RTECS號(hào) OL5989850

F3-10

白色或微白色凍干粉，溶于水，不溶于乙醚和丙酮，pI為11.0-11.35，最適pH值6.5。

穩(wěn)定性：酸性介質(zhì)中可穩(wěn)定存在，堿性介質(zhì)中易失活；96℃， pH值為3條件下，15min后活力保持87%。

抑制劑：有碘、咪唑和吲哚衍生物、表面活性劑(十二烷基硫酸鈉、醇類和碳鏈不少于12的脂肪酸)。1%水溶液在281.5nm處的吸光系數(shù)為26.4。通過水解細(xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖來(lái)溶菌。

酶反應(yīng)：Micrococcus luteus或Micrococcus lysodeikticus菌懸浮液═溶菌并澄清。

用途：用于生化研究，臨床上用于急慢性咽喉炎、扁平苔癬、扁平疣等疾病的治療。

以蛋清為原料，在pH6.5條件下用弱酸性陽(yáng)離子交換樹脂732吸附后，再用硫酸銨洗脫，經(jīng)透析后冷凍干燥得產(chǎn)品。

溶菌酶是采用生物工程技術(shù)進(jìn)行克隆、提取而制取,它是一種天然酶，安全綠色的添加劑，無(wú)抗藥性。

該酶廣泛存在于人體多種組織中，鳥類和家禽的蛋清、哺乳動(dòng)物的淚、唾液、血漿、尿、乳汁等體液以及微生物中也含此酶，其中以蛋清含量最為豐富。從雞蛋清中提取分離的溶菌酶是由18種129個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成的單一肽鏈。它富含堿性氨基酸，有4對(duì)二硫鍵維持酶構(gòu)型，是一種堿性蛋白質(zhì)，其N端為賴氨酸，C端為亮氨酸?？煞纸馊鼙谖⑶蚓⒕薮笱挎邨U菌、黃色八疊球菌等革蘭陽(yáng)性菌。

溶菌酶在等電點(diǎn)以下較廣泛的pH值范圍內(nèi)，分子帶正電荷，可吸附于弱酸性陽(yáng)離子交換樹脂上，洗脫后鹽析，可得溶菌酶沉淀，再進(jìn)行精制可得成品。蛋清吸附↓724樹脂洗滌↓緩沖液洗脫↓硫酸銨溶液鹽析透析去堿性蛋白↓NaOH凍干溶菌酶凍干粉沉淀干燥溶菌酶在5～10℃下，將新鮮蛋清540kg加入到已處理好的80kg 724樹脂中，攪拌吸附6h，在0～5℃靜置過夜。傾出上層蛋清，樹脂離心甩干，用蒸餾水反復(fù)洗去黏附的卵蛋白，然后將樹脂裝入柱內(nèi)，用0?15mol/L、pH=6?5磷酸緩沖溶液約150L洗滌樹脂，再用約600L的10%硫酸銨溶液洗脫，收集洗脫液。洗脫液中加硫酸銨，使最終含硫酸銨量為40%，有白色沉淀生成，冷處放置過夜。虹吸上層清液，沉淀吸濾抽干，再用1倍蒸餾水溶解沉淀呈稀糊狀，然后裝入透析袋，在約5℃的條件下，對(duì)蒸餾水透析24h左右，中間換水2～3次。離心去除沉淀，沉淀再用少量水洗一次，洗液與離心液合并。再往透析清液中慢慢加入1mol/L氫氧化鈉溶液，同時(shí)不斷攪拌，使pH值上升到8?0～9?0，如有白色沉淀，即離心除去。然后用3mol/L鹽酸調(diào)pH=5?0，冷凍干燥，即得白色片狀溶菌酶。也可將離心液用3mol/L鹽酸調(diào)pH=3?5，在攪拌下緩慢加入5%的固體氯化鈉，在約5℃的溫度下靜置48h，離心，沉淀用0℃丙酮洗滌，干燥，即得溶菌酶。

1．溶菌酶是很穩(wěn)定的蛋白質(zhì)，有較強(qiáng)的抗熱性。蛋清溶菌酶是C型，是已知的最耐熱的酶；

2．溶菌酶不會(huì)因?yàn)橛袡C(jī)溶劑的處理而失活，當(dāng)轉(zhuǎn)移到水溶液中時(shí)，溶菌酶的活力可全部恢復(fù)；

3．溶菌酶可被冷凍或干燥處理，且活力穩(wěn)定；

4．溶菌酶適宜pH5.3~6.4，可用于低酸性食品防腐；

5．溶菌酶生產(chǎn)成本較低；

6．溶菌酶的抗菌譜較廣，不僅局限于G- 菌，對(duì)部分G+菌也有抑制效果；

7．溶菌酶作為防腐劑安全性高。溶菌酶是一種天然蛋白質(zhì)，1992年FAO/WTO 的食品添加劑協(xié)會(huì)已經(jīng)認(rèn)定溶菌酶在食品中應(yīng)用是安全的。

它對(duì)革蘭陽(yáng)性菌、好氧性孢子形成菌、枯草桿菌、地衣型芽孢桿菌等都有抗菌作用，而對(duì)沒有細(xì)胞壁的人體細(xì)胞不會(huì)產(chǎn)生不利影響。因此，適合于各種食品的防腐。另外，該酶還能殺死腸道腐敗球菌，增加腸道抗感染力，同時(shí)還能促進(jìn)嬰兒腸道雙歧乳酸桿菌增殖，促進(jìn)乳酪蛋白凝乳利于消化，所以又是嬰兒食品、飲料的良好添加劑。溶菌酶對(duì)人體完全無(wú)毒、無(wú)副作用，具有抗菌、抗病毒、抗腫瘤的功效，是一種安全的天然防腐劑。在干酪的生產(chǎn)中，添加一定量的溶菌酶，可防止微生物污染而引起的酪酸發(fā)酵，以保證干酪的質(zhì)量。新鮮的牛乳中含有少量的溶菌酶，每100mL約含13mg，而人乳中含有40mg/mL溶菌酶。若在鮮乳或奶粉中加入一定量的溶菌酶，不但有防腐保鮮劑的作用，而且可達(dá)到強(qiáng)化嬰兒乳品的目的，有利于嬰兒的健康 。

可作為一種具有殺菌作用的天然抗感染物質(zhì)。有抗菌、抗病毒、止血、消腫止痛及加快組織恢復(fù)功能等作用。臨床用于慢性鼻炎、急慢性咽喉炎、口腔潰瘍、水痘、帶狀皰疹和扁平疣等。也可與抗菌藥物合用治療各種細(xì)菌和病毒感染?？诜图∽⒕行А？诜?，3～5片/次(腸溶片含10mg)，3次/日。口含，1片/次(口含片含20mg)，4～6次/日。外用：以1%～2%溶液滴注、涂擦或直接噴粉。肌注，50mg～100mg/次，1～2次/日。滴眼：用2%溶液。

副作用

偶有較輕的過敏反應(yīng)。氯化溶菌酶醫(yī)療效果更廣，有濃痰分散、出血抑制、組織修復(fù)、消炎鎮(zhèn)痛、抗過濾性病毒等作用，因而用氯化溶菌酶的制藥有消炎消痔、治感冒、皮膚病及眼、鼻、喉等用藥.

可作為防腐劑，它的主要功用是水解細(xì)菌細(xì)胞壁，在細(xì)胞內(nèi)，則對(duì)吞噬后的病原菌起破壞作用.該酶對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌中的枯草桿菌、耐輻射微球菌有分解作用。對(duì)大腸桿菌、普通變形菌和副溶血性弧菌等革蘭氏陰性菌也有一定程度溶解作用，其最有效濃度為0.05%。與植酸、聚合磷酸鹽、甘氨酸等配合使用，可提高其防腐效果。

1． 溶菌酶是一種無(wú)毒、無(wú)副作用的蛋白質(zhì)，又具有一定的溶菌作用，因此可用作天然的食品防腐劑?，F(xiàn)已廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)品、肉食品、蛋糕、清酒、料酒及飲料中的防腐；還可以添入乳粉中，使牛乳人乳化，以抑制腸道中腐敗微生物的生存，同時(shí)直接或間接地促進(jìn)腸道中雙歧桿菌的增殖。

2． 溶菌酶作為一種存在于人體正常體液及組織中的非特異性免疫因素，具有多種藥理作用，它具有抗菌、抗病毒、抗腫瘤的功效，醫(yī)用溶菌酶其適應(yīng)癥為出血、血尿、血痰和鼻炎等。

3． 溶菌酶具有破壞細(xì)菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)的功能，以此酶處理G+細(xì)菌得到原生質(zhì)體，因此，溶菌酶是基因工程、細(xì)胞工程中細(xì)胞融合操作必不可少的工具酶。

溶菌酶能有效地水解細(xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖，其水解位點(diǎn)是N-乙酰胞壁酸(NAM)的1位碳原子和N-乙酰葡萄糖胺(NAG)的4位碳原子間的β-1.4糖苷鍵。肽聚糖是細(xì)菌細(xì)胞壁的主要成份，它是由NAM、NAG和肽“尾”(一般是4個(gè)氨基酸)組成，NAM與NAG通過β-1.4糖苷鍵相連，肽“尾”則是通過D-乳酰羧基連在NAM的第3位碳原子上，肽尾之間通過肽“橋”(肽鍵或少數(shù)幾個(gè)氨基酸)連接，NAM、NAG、肽“尾”與肽“橋”共同組成了肽聚糖的多層網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，作為細(xì)胞壁的骨架，上述結(jié)構(gòu)中的任何化學(xué)鍵斷裂，皆能導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞壁的損傷。對(duì)于革蘭氏陽(yáng)性菌（G+），如藤黃微球菌、枯草桿菌或溶壁微球菌等，與革蘭氏陰性菌(G-)，如大腸桿菌、變形桿菌、痢疾桿菌、肺炎桿菌等，其細(xì)胞壁中肽聚糖含量不同，G+細(xì)菌細(xì)胞壁幾乎全部由肽聚糖組成，而G-細(xì)菌只有內(nèi)壁層為肽聚糖，因此，溶菌酶對(duì)于破壞G+細(xì)菌的細(xì)胞壁較G-細(xì)菌強(qiáng)。

雞蛋清溶菌酶作為溶菌酶類的典型代表，是一種穩(wěn)定的蛋白質(zhì)，其最適pH為4-6.5，最適溫度為35℃，酶的最適添加量必須按照具體生產(chǎn)情況而定。

建議在陰涼干燥的環(huán)境下避光保存，儲(chǔ)存溫度：零度以下。

貯藏過久或貯藏條件不利，會(huì)使酶活不同程度的降低；如溫度濕度過高，則需要在使用時(shí)適當(dāng)?shù)脑黾邮褂昧俊?/div> ③急性單核細(xì)胞白血病時(shí)，血清溶菌酶含量增加，超過腎小管重吸收的能力，尿內(nèi)溶菌酶可升高。
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