赤蘚紅

化學(xué)名稱：9-(o-羧基苯基)-6-羥基-2, 4,5, 7-四碘-3H-呫噸-3-酮二鈉鹽一水合物

由熒光素碘化而得。將間苯二酚；苯酐和無水氯化鋅加熱熔融，得到粗制熒光素。粗品熒光素用乙醇精制后，溶解在氫氧化鈉溶液中，再加碘進(jìn)行反應(yīng)。加入鹽酸，析出結(jié)晶，然后將其轉(zhuǎn)變成鈉鹽，濃縮即得。

該品可單獨(dú)使用或與其他食用色素配合，用于糕點(diǎn)；農(nóng)產(chǎn)水產(chǎn)加工品（櫻桃；魚糕；針錦八寶醬菜）等多種食品。中國食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)（GB2760-86）規(guī)定，赤鮮紅在食品中最大使用量為0.05g/kg。此外，該品還用作藥物和化妝品的色素。大鼠口服LD50為1900mg/kg，聯(lián)合國糧農(nóng)組織和世界衛(wèi)生組織規(guī)定，人的一日允許攝取量（ADI）為0-1.25mg/kg。

 

外觀：本品為紅至紅褐色粉末或顆粒

理化指標(biāo)：

儀器試劑

乙酸；鹽酸；乙酸銨溶液：1.5g/L；分光光度計；比色皿：10mm。

試驗(yàn)方法：

稱取0.1g試樣，溶于100mL水中，呈帶藍(lán)光的紅色澄清溶液，取5mL溶液加入1mL鹽酸，則產(chǎn)生紅色沉淀。

稱取0.1g試樣溶于硫酸溶液顯褐黃色，取此液2～3滴加水5mL，產(chǎn)生橙紅色沉淀。

稱取試樣約0.1g（精確至0.01g），溶于100mL乙酸銨溶液中，取此溶液1mL，加乙酸銨溶液配至100mL，該溶液的最大吸收波長為526nm±2nm。

赤蘚紅含量的測定方法有重量法、分光光度比色法、高效液相色譜法、示波極譜法、表面增強(qiáng)拉曼光譜。

重量法（仲裁法）

1、方法提要

試樣溶解后，經(jīng)稀釋、酸化、煮沸，并經(jīng)過恒重過濾，再恒重，然后進(jìn)行稱量計算。

2、儀器試劑

鹽酸溶液：1+49；1+199；儀器、設(shè)備：G4玻璃砂坩堝形過濾器。

3、測定方法

稱取約2.5g 試樣（精確至0.0001g），置于燒杯中，用水溶解后移入250mL 容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻。吸取50mL 該溶液，置于250 mL 燒杯中，加熱至沸騰后，加入20 mL 鹽酸溶液(1+49)，再次煮沸，然后用5 mL 水沖洗燒杯內(nèi)壁，蓋上表面皿，在沸水浴上加熱約5h 后，放冷至室溫，用已在135℃±2℃烘至恒量，并冷卻稱量過的G4 玻璃砂芯坩堝，將沉淀物過濾。再每次用15mL 鹽酸溶液(1+199)沖洗，洗滌二次后，再用15mL 水洗一次，將沉淀物和G4 玻璃砂芯坩堝在135℃±2℃恒溫干燥箱中烘至恒量，在干燥器內(nèi)冷卻30min 后稱量。

分光光度比色法

1、方法提要

將試樣與已知含量的標(biāo)樣分別用水溶解后，在最大吸收波長處，分別測其吸光度，然后計算出試樣的含量。

2、儀器試劑

乙酸銨溶液；赤蘚紅標(biāo)準(zhǔn)樣品（含量≥85.0%）；分光光度計；比色皿：10mm。

3、測試方法

赤蘚紅標(biāo)樣溶液的配制：稱取約0.25g（精確至0.0001g）赤蘚紅標(biāo)準(zhǔn)樣品，溶于適量水中，移入1000mL 棕色容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。準(zhǔn)確吸取10 mL，移入500 mL 棕色容量瓶中，加乙酸銨溶液稀釋至刻度，搖勻。

赤蘚紅試樣溶液的配制：稱量與操作方法同標(biāo)樣溶液的配制。

將赤蘚紅標(biāo)樣溶液和赤蘚紅試樣溶液分別置于10mm 比色皿中，同在最大吸收波長處用分光光度計測定各自的吸光度值，用乙酸銨溶液作參比液。 

高效液相色譜法

1、方法提要

食品中的合成著色劑經(jīng)聚酰胺吸附法或液一液分配法提取后，制成水溶液，注入高效液相色譜儀，經(jīng)反相色譜分離，根據(jù)保留時間定性和與峰面積比較進(jìn)行定量。
利用高效液相色譜法測定食品中合成著色劑的最小檢出量為18ng，當(dāng)進(jìn)樣量為0.025g樣品時，最低檢出濃度為0.20.72mg/kg。

2、測定方法

將制備好的樣品溶液放入分液漏斗中，加2mL鹽酸、三正辛胺正丁醇溶液(5%)10～20mL，充分振搖提取，靜置分取有機(jī)相，重復(fù)提取2～3次，每次10mL，直至有機(jī)相無色，合并有機(jī)相，用飽和硫酸鈉溶液洗2次，每次10mL，分取有機(jī)相，放于蒸發(fā)皿中，水浴加熱濃縮至l0mL，轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，加60mL正己烷，混勻，加氨水提取2～3次，每次5mL，合并氨水溶液層(含水溶性酸性色素)，用正己烷洗 2～3次，分取氨水層加乙酸調(diào)成中性，水浴加熱蒸發(fā)至近干，加水定容至5mL。經(jīng)濾膜(0.45μm)過濾，取10μL進(jìn)高效液相色譜儀。

高效液相色譜分析參考條件

①色譜柱：YWG-Cl8，10μm不銹鋼柱，4.6mm×250mm。
②流動相：甲醇一乙酸銨溶液(0.02 mol/L)(pH4)。
③梯度洗脫：用濃度為20%～35%的甲醇洗脫5min；用濃度為35%～98%的甲醇5min；用濃度為98%的甲醇繼續(xù)洗脫6min。
④流速：1mL/min。
⑤紫外檢測器，波長254nm。

取相同體積樣液和合成著色劑標(biāo)準(zhǔn)使用液分別注入高效液相色譜儀，根據(jù)保留時間定性，外標(biāo)峰面積法定量。

示波極譜法

1、儀器試劑

JP一303型示波極譜儀成都儀器廠；三電極系統(tǒng)滴汞電極、飽和甘汞電報、鉑電極；底液0．25 tool/L乙酸鈉一1 40 mol/L己酸(pH3．6)緩沖液；鹽酸、三正辛胺、正丁醇、正己烷、己酸；飽和硫酸鈉溶液；氨水(2+98)；赤蘚紅標(biāo)準(zhǔn)溶液(1 n~ nlL)。

2、測定方法

極譜條件：取適量上述樣品提取液0．10 1．00mL于10 mL具塞比色管中，加入底液至10 0mL，混勻，倒入電解池中測定。三電極系統(tǒng)，陰極二階導(dǎo)數(shù)掃描．超始電位一350 mv，于一570]TIr~r記錄極譜導(dǎo)數(shù)波高。

標(biāo)準(zhǔn)曲線制備：取赤蘚紅標(biāo)準(zhǔn)0．00，0．50，1．0o，2 50，5．0o，10．0，20．0，50 0 ug于10 mL比色管中，進(jìn)行測定。 

表面增強(qiáng)拉曼光譜法

方法提要

理論計算拉曼采用密度泛函理論(DFT)在B3LYP/6-31G(d)水平上對赤蘚紅分子進(jìn)行了構(gòu)型優(yōu)化,赤蘚紅的實(shí)驗(yàn)拉曼光譜與理論計算拉曼對比具有很好的對應(yīng)性。采用金納米顆粒作為表面增強(qiáng)拉曼基底,從赤蘚紅與金膠混合體積比、溶液pH和混合時間對檢測條件進(jìn)行優(yōu)化,混合體積比為1:1、pH為5、混合時間為10min時赤蘚紅溶液的檢測限可達(dá)到1μg/mL。研究結(jié)果證明以金膠為增強(qiáng)基底的表面增強(qiáng)拉曼光譜法可以快速準(zhǔn)確地鑒定赤蘚紅,為日后檢測常規(guī)食品樣品中的赤蘚紅提供了基礎(chǔ)。

赤蘚紅在食品中的使用限量。 

赤蘚紅作為一種人工合成色素，色澤鮮艷，本低廉，常用于食品加工制品和飲料中，以提高其感官性。大量廠家為了改變產(chǎn)品外觀，吸引消費(fèi)者購買，濫用人工合成色素。美、英等國的科研人員在進(jìn)行相關(guān)的研究后發(fā)現(xiàn)，人工合成色素非但不能向人體提供營養(yǎng)物質(zhì)，而且會導(dǎo)致生育力下降、畸胎等等，甚至可能轉(zhuǎn)換成致癌物質(zhì)。此外，許多食用合成色素在生產(chǎn)過程中還可能混入砷和鉛。過去用于人造奶油著色的奶油黃，早已被證實(shí)可以導(dǎo)致人和動物患上肝癌，而其它種類的合成色素如橙黃能導(dǎo)致皮下肉瘤、肝癌、腸癌和惡性淋巴癌等。大多數(shù)色素只是改善食品的外觀，不能被人體吸收，而是通過肝臟或腎臟代謝后排出體外，無形中增加了肝腎負(fù)擔(dān)。但是一些個體商販和個別生產(chǎn)廠家，只顧片面追求利潤，在食品和飲料中隨意使用人工合成色素，把食品打扮得色彩斑斕，長期食入不符規(guī)定著色劑的食品后，就會對人體健康產(chǎn)生不良的影響。正處于生長發(fā)育期的兒童，對有毒物質(zhì)的代謝能力本來就比成年人低，加上體內(nèi)器官功能比較脆弱，神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育尚不健全，對化學(xué)物質(zhì)尤為敏感，若過多過久地食用色素濃的食品，會影響神經(jīng)系統(tǒng)，容易引起好動、情緒不穩(wěn)定、注意力不集中、自制力差、行為怪癖、食欲減退等不良癥狀。